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    可靠的蛋白定量和表征,结构生物学的好伙伴

    结构生物学是生命科学的重要组成部分,主要研究生物大分子的分子结构和形成,探讨生物大分子的作用机制和原理。通过了解结构的特点,深入理解蛋白质如何在生命活动中进行工作,进而为探寻疾病根源、设计新药提供新路径。短短几十年发展历史中,已有十余个贝尔奖颁给了结构生物学领域。结构生物学当前是生物学家感兴趣的领域之一。

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    每个生物大分子都具有独特的三级结构,这取决于每个分子的“一级结构”线性序列。理解分子的三级结构是研究功能的基本前提。生物分子太小,即使用光学显微镜也无法观察。为了可视化大分子的结构,需要使用波长更短的辐射方法,以获得足够高的分辨率。蛋白质的结构生物学主要研究方法包括:

    •质谱(MS)

    •高分子晶体学(X射线/XRC)

    •核磁共振波谱(NMR)

    •电子顺磁共振波谱(EPR)

    •冷冻电镜(cryo EM)

    •电子结晶学和微晶电子衍射

    •多角度光散射

    •小角散射

    •激光吸收光谱法(LAS)

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    浙江大学冷冻电镜中心 

    Nanophotometer® NP80用于蛋白浓度测量

    通常,所有这些方法都需要高纯度的蛋白质样品,以提供可靠和可重复的结果,并避免潜在伪影和杂质引起的误导性观察和错误。在进行精细的仪器分析之前,使用尽可能少量的样本进行质量控制,是十分必要的的,可避免浪费珍贵的样本和时间。

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    清华大学结构生物学创新中心《Cell Discovery》

    Nanophotometer®用于测量纯化后的ABCB6蛋白浓度

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    中科院生物物理所 生物大分子重点实验室《Nature Plants》

    Nanophotometer®NP80

    用于测量光合作用PSI–LHCI–LHCII超分子复合物的光谱表征

    蓝色:野生型;绿色:ΔLhcbM1突变型;红色:ΔLhcbM5突变型

    Nanophotometer®作为微量样品浓度测量的标准仪器,特别适用于珍贵的蛋白质样品的分析。所采用的样品压缩技术,在检测过程中无需形成液柱,避免了纯化后的蛋白质样品表面张力降低的问题,因而在蛋白质测量中具备优势。此外,低仅需0.3µl的样品体积即可进行进行测量,大幅节省了珍贵样品。封闭的检测环境避免了测量过程中样品的挥发。样品台良好的化学兼容性,可测量含有多种有机溶剂成分的样品(具体请遵循化学兼容性表)。另外,通过全光谱扫描功能,还可获得不同突变体样品的光谱学表征,以反映精细结构的改变。

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    Sample Control™ 样品质量控制功能,作为样品质量监测手段,为研究人员提供了可靠的信息,样品中存在的的污染物将被标记和提供信息。系统可通过A260/280比值对样品纯度进行评估,如比值在0.5和0.6范围之间,表示蛋白质纯度高,用于也可根据自己的要求定义阈值。

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    大多数情况下,结构生物学所分析的生物大分子来源于表达和纯化的流程,Nanophotometer®丰富的功能也能应用于各个环节:

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    Implen Nanophotometer®已应用于清华大学结构生物学创新中心,浙江大学冷冻电镜中心、中科院生物物理所生物大分子国家重点实验室等结构生物学研究机构和制药公司,广泛应用于结构生物学领域的样品表征和质控。如您有相关应用需求,Implen是值得您信赖的伙伴。

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